3T3-L1前脂肪细胞的体外培养及胰岛素样生长因子1对其增殖、分化的作用

• 作者: 刘秀华 沈俐 王鑫
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 3T3-L1前脂肪细胞 胰岛素样生长因子1 细胞培养
• 年，卷（期）: 2008,（51）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 10121-10124
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4731字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.51.024

摘要

背景:前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化潜力的特异化的前体细胞,如果能够找到可以强力促进前脂肪细胞增殖和分化的因子或药物,在脂肪组织移植的同时使用,则有希望提高脂肪组织的移植效果.目的:摸索体外培养经典的3T3-L1前脂肪细胞的最佳培养环境并积累培养经验,观察胰岛素样生长因子1对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响,并探求胰岛素样生长因子1的最佳作用剂量.设计、时间及地点:以细胞为对象的对照观察实验,于2007-10/2008-02在辽宁医学院科学实验中心完成.材料:3T3-L1前脂肪细胞株购于上海中科院生命科学院:胰岛素样生长因子1购于美国Biological公司.方法:根据3T3-L1前脂肪细胞的体外培养条件分为6组:空白对照组应用含体积分数为0.1的胎牛血清的标准高糖DMEM培养基培养:各实验组分别应用含有5,10,20,50,100 μ g/L胰岛素样生长因子1的含体积分数为0.1的胎牛血清的高糖DMEM培养基培养.主要观察指标:倒置显微镜下观察各组3T3-L1前脂肪细胞的生长、增殖及分化情况并拍照记录.待细胞铺满瓶底达到单层汇合时,应用流式细胞仪检测细胞周期,应用四甲基偶氮唑盐比色法测定3T3-L1前脂肪细胞的增殖率:应用油红O染色提取法测定3T3-L1前脂肪细胞内脂肪含量的增殖率.结果:①倒置显微镜下观察分化前3T3-L1前脂肪细胞呈梭形,胞浆内无脂滴,分化后3T3-L1前脂细胞呈圆形,胞浆内舍有大量的脂滴,脂滴聚集于核周,被油红O染成橙红色,形成"戒环"样形态.②四甲基偶氮唑盐比色法和油红O染色提取法检测结果均显示,不同剂鞋的胰岛素样生长因子1组中3T3-L1前脂肪细胞的增殖率及细胞内脂肪含量的增殖率均高于空白对照组(P<0.05),胰岛素样生长因子1 20 μ g/L组对3T3-L1前脂肪细胞的增殖、分化作用最为明显(P<0.05):流式细胞仪的分析结果与四甲基偶氮唑盐比色法及油红O染色提取法的枪测结果基本一致.结论:体外细胞培养实验表明,胰岛素样生长因子1对3T3-L1前脂肪细胞的增殖、分化有明显促进作用,其促进作用与浓度并非成正比,而是达到一定剂量后,其促进作用不再增加,而这个剂量接近本实验的最佳剂量值,即20 μ g/L.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王鑫	天津市汉沽区汉沽医院口腔科	1	10	1.0	1.0
2	刘秀华	天津市汉沽区汉沽医院口腔科	1	10	1.0	1.0
3	沈俐	天津市汉沽区汉沽医院口腔科	1	10	1.0	1.0