改进酶消化法培养SD大鼠成骨细胞及其鉴定

• 作者: 刘宁 吴昊 姚平 张嘉晴 杨淑野 查振刚 王双利
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 成骨细胞 大鼠 改进酶消化法
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 915-918
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 5898字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2008.06.012

摘要

目的:改进SD大鼠成骨细胞的体外分离、培养方法并进行功能鉴定.方法:将新生SD大鼠处死,无菌条件下取出颅骨,剔净骨膜后剪成1 mm×1 mm×1 mm大小组织块.组织块经0.25%胰蛋白酶消化20min,继以0.1%Ⅱ型胶原酶消化60min,收集上清离心,所得成骨细胞接种于培养瓶中并行"多次贴壁法"纯化.观察细胞形态学,选用碱性磷酸酶Gomori钙钴法染色,钙结节茜素红法染色及I型胶原免疫组化染色等方法进行鉴定.结果:培养的细胞具有典型的成骨细胞形态特征,在体外培养时可维持其在体内的功能,即合成碱性磷酸酶、形成矿化结节,I型胶原染色阳性.结论:用改进后的酶消化法分离、培养SD大鼠成骨细胞,更能减少胰蛋白酶在消化过程中对细胞造成的损伤,所获成骨细胞量多、纯度高,操作简易可行,可作为骨组织工程种子细胞常规的培养方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚平	暨南大学医学院生理教研室	52	669	13.0	24.0
2	吴昊	暨南大学附属第一医院骨科	51	634	12.0	24.0
3	查振刚	暨南大学附属第一医院骨科	147	1152	15.0	28.0
4	张嘉晴	暨南大学医学院生化教研室	10	79	5.0	8.0
5	刘宁	暨南大学附属第一医院骨科	55	420	11.0	18.0
6	王双利	暨南大学附属第一医院骨科	10	73	5.0	8.0
7	杨淑野	暨南大学附属第一医院骨科	5	44	3.0	5.0