睾丸支持细胞对体外培养鼠胎脑皮质细胞的影响

• 作者: 史小林 梁元晶 赵佳 金洁
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 睾丸支持细胞 脑皮质细胞 多巴胺能神经元 体外培养
• 年，卷（期）: 2008,（43）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 8490-8494
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5702字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.43.027

摘要

背景:目前绝大多数研究者将目标指向功能细胞,为改善细胞的生存环境而给予一些生长因子.睾丸支持细胞能分泌大量营养物质及生长因子,且其所具有的Fas配体町降低移植入体内后宿丰的免疫排斥.目的:探讨睾丸支持细胞对体外培养鼠胚胎人脑皮质细胞的影响.设计、时间及地点:细胞学体外观察实验,于2005-10/2007-09在首都医科大学生殖医学研究中心实验室完成.材料:健康SPF级10～15 d龄雄性ICR小鼠40只,用于提取睾丸支持细胞:15 d龄胎鼠40只,用于提取大脑皮质细胞.方法:将分离的大脑皮质细胞密度调整为2×109 L-1,分为2组:实验组接种F预铺有70%汇合传代的睾丸支持细胞培养瓶中,加入含体积分数为0.1的FBS、1×10U/L青霉素、0.01 g/L链霉素的DMEM/F12完全培养基,置于37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度环境下培养17d:对照组接种丁预铺育0.05%多聚右旋赖氨酸的培养瓶中单独培养.主要观察指标:采用免疫组织化学法,免疫细胞化学法、免疫细胞荧光法进行细胞鉴定,检测神经元、神经球数量及酪氨酸羟化酶刚性率.结果:两组细胞神经元特异性烯醇化酶、巢蛋白、酩氨酸羟化酶均争阳性表达.与培养2h比较,随培养时间的延长两组贴壁神经元数均明显减少(P＜0.01),但实验组各时间点贴擘神经元数均明显多于对照组(P＜0.01).实验组干培养3 d出现神绛球,数量多且变化较快,7d后开始争现明显的下降趋势,至17 d神经球接近消失:对照组仅可见散在巢蛋白阳性表达细胞,未出现神经球n实验组酪氨酸羟化酶阳性细胞率随培养时间的延长而逐渐升高,至11 d达高峰,且各培养时间点酪氨酸羟化酶阳性细胞率均高于对照组(P＜0.01).结论:睾丸支持细胞可有效促进鼠胎脑皮质细胞的贴壁及生长,在促进神经干细胞增殖的同时诱导其向多巴胺能神经元分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁元晶	首都医科大学生殖医学研究中心	26	116	7.0	10.0
2	金洁	首都医科大学生殖医学研究中心	19	61	4.0	6.0
3	史小林	首都医科大学生殖医学研究中心	64	329	9.0	15.0
4	赵佳	首都医科大学生殖医学研究中心	2	3	1.0	1.0