摘要:
背景:核因子κB可能与葡萄膜巩膜房水流出通道的多种细胞信号调控有关.目的:观察前列腺素类曲伏前列腺素药物作用下,体外培养的人睫状肌细胞核因子кB及其抑制因子(inhibitor,IκB)的变化.设计、时间及地点:对比观察实验,于2005-03/2006-11在中山眼科中心实验室完成.材料:供体取自中山眼科医院,摘自死亡 1 h内无眼疾青年尸体眼球.患者家属对实验知情同意,并自愿捐献.方法:在人睫状肌细胞培养基中加1 μmol/L曲伏前列腺素,根据孵育时间的不同分为4组,即0 h对照组和6,12,24 h组.主要观察指标:采用real-time RT-PCR、免疫荧光半定量分析和ELISA法分别检测上述时间组核因子κB p65、ⅠκBα在基因和蛋白水平的表达.结果:①与对照组比较,6,12,24 h组核因子κB p65 mRNA表达均下降(F= 17.068,P=0.001);IκBαmRNA 6 h组、12 h组较对照组改变不明显(P > 0.05),24 h组较对照组表达增加(F=32.742,P=0.000).②免疫荧光半定量分析表明:核因子κB p65荧光强度6,12,24 h组均较对照组减少(F=17.216,P=0.000);IκBα6 h组较对照组没有明显改变(P=0.134)、12 h组较对照组轻微下降(P=0.032),24 h组较对照组明显增加(F=17.346,P=0.001).③ELISA法检测磷酸化核因子κB p65随药物作用时间延长而逐渐下降(F=15.4,P=0.001).结论:曲伏前列腺素作用于人睫状肌细胞后,核因子κB p65的基因表达下调,核易位抑制,IκBα的基因表达上调.