小鼠胚胎干细胞源性肝细胞的培养体系及分选

• 作者: 徐令 范新兰
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎干细胞 肝细胞 增殖
• 年，卷（期）: 2008,（51）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 10025-10027
• 页数: 3页
• 分类号: R394.2
• 字数: 3059字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.51.028

摘要

背景:已证实细胞可以向肝细胞分化.目前的研究集中在诱导分化上,对分化的肝细胞进行分选和进一步扩增研究较少.目的:比较不同的培养体系对胚胎干细胞源性的肝细胞生长的影响.设计:对比观察.材料:ESD-3细胞由上海细胞生物学研究所丛笑倩教授提供.方法:采用半固体培养D3小鼠胚胎下细胞系,形成胚胎体.将来源于18 d的胚胎体用胰酶消化为单个细胞,在胶原处理过的培养皿中贴壁2 h,分别采用Novaslem培养体系、肝细胞培养液培养体系和普通培养体系培养3 d.前2种培养体系又各分为含去除肝脏小鼠血清、含正常小鼠血清和无血清组3组,普通的培养体系分为含正常小鼠血清和含体积分数为0.1的胎牛血清2组.每组细胞均加入20μ g/L肘细胞生长因子、20 μ g/L表皮生长因子.主要观察指标:细胞计数法分析细胞的增殖率,反转录-聚合酶链反应检测自蛋白的表达以及有限稀释聚合酶链反应法半定量检测胚胎源性盯细胞的含量.结果:①胚胎工细胞源性的肘细胞在不同的培养体系中,生长速度和肝细胞的含量不一样,在加有正常小鼠血清的Novastem培养基中,细胞增殖最快,在无血清的Novastem培养体系中,胚胎干细胞源性的肝细胞含量明显增高.②除了DMEM+体积分数为0.1的胎牛血清组未检测到外,其他组均检测到了白蛋白表达.⑨在无血清Novastem培养体系中,肝样细胞含量明显增多.结论:无血清的Novastern培养体系能分选和扩增分化的肝细胞,提高肝细胞纯度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范新兰	中山大学附属第二医院医学研究中心	11	30	4.0	5.0
2	徐令	中山大学附属第二医院医学研究中心	20	106	7.0	9.0