纳米羟基磷灰石颗粒对巨噬细胞DNA的损伤

• 作者: 丁婷婷 孙皎
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 纳米颗粒 羟基磷灰石 DNA损伤 反转录-聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 15-18
• 页数: 4页
• 分类号: R318.08
• 字数: 4263字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.01.006

摘要

目的:纳米颗粒由于其特殊的尺寸效应,会对细胞内处于纳米尺寸级的RNA、DNA和蛋白质等生物大分子直接产生不良影响,使生物体受到损害.因此,从分子水平上探讨纳米羟基磷灰石颗粒对细胞DNA损伤的相关基因或蛋白的影响具有重要的科学意义.方法:实验于2005-12/2006-12在上海生物材料研究测试中心完成.①实验材料:纳米羟基磷灰石颗粒由中科院上海硅酸盐所提供,粒径大小为30～80 nm.300 W/40 kHz的超声条件下,用含体积分数为0.1小牛血清的RPMI-1640振荡纳米颗粒,制备成终浓度为1 g/L的悬浮液,4 ℃保存1周.②实验方法:选用RT-PCR的技术,通过原代培养大鼠腹腔巨噬细胞,在分子水平上检测纳米羟基磷灰石颗粒对DNA损伤通路中P53、P21、gadd45以及HSP70这些关键蛋白转录水平的影响.结果:通过mRNA水平的检测,发现P53、P21及HSP70的表达均随着纳米羟基磷灰石颗粒浓度的增加而升高,并在100 mg/L条件下P53、P21及HSP70有显著性表达(P < 0.05),而当纳米羟基磷灰石颗粒达到200 mg/L,只有P21的表达反而有所降低,同时各浓度的纳米羟基磷灰石颗粒对gadd45表达无明显影响(P > 0.05).结论:实验证实了100 mg/L 纳米羟基磷灰石颗粒可以引起DNA的明显损伤.并且当纳米羟基磷灰石颗粒浓度达到200 mg/L时,受损的DNA已不易被修复.同时,P53和HSP70可成为评价纳米羟基磷灰石颗粒安全性较为灵敏的指标.