不同品系小鼠骨髓间质干细胞扩增能力及细胞表型差异的比较

• 作者: 郑芹 郭振宇 雷俊霞
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间质干细胞 体外培养 扩增 C57BL/6 BALB/c
• 年，卷（期）: 2008,（47）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 9257-9260
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4616字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.47.016

摘要

背景:虽然近年来对小鼠骨髓间质干细胞分离培养的报道层出不穷,但就其方法而言,有的操作步骤过于繁琐,有的不适用于国内相关实验,如采用一系列抗体负选或利用自行研制的新抗体筛选.目的:拟建立简便稳定的小鼠骨髓间质干细胞体外分离和扩增的方法,并比较不同品系小鼠骨髓间质干细胞的生物学特点.设计、时间及地点:细胞学体外对比观察,于2007-04/09在中山大学中山医学院病理生理教研室完成.材料:清洁级6周龄雄性C57BL/6和BABL/C小鼠各5只,由中山大学中山医学院实验动物中心提供.方法:取两种品系小鼠双侧股骨,去除股骨上附带组织,用含10%FCS的DMEM培养基冲洗骨髓腔,过200目不锈钢网,收集骨髓细胞,用Tris-NH4C1红细胞裂解液溶解2 min,用含10%FCS的DMEM培养基调整细胞浓度,按500个细胞/孔低密度接种于24孔板,置于37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中.出现成纤维样细胞克隆后消化收集并移至6孔板,待细胞70%～80%融合时消化传代.主要观察指标:细胞形态和生长特点,流式细胞仪检测细胞表型,茜素红染色观察成骨诱导情况,油红O染色观察成脂诱导情况.结果:约培养2周可形成细胞克隆,经历一缓慢扩增阶段后,第6～7代细胞生长明显加快,可见形态均一的成纤维细胞群,呈典型的旋涡状生长,两种品系小鼠骨髓问质干细胞均可传至10代以上,但C57BL/6小鼠骨髓间质干细胞体外扩增能力更强.C57BL/6和BABL/C小鼠骨髓间质干细胞均呈CD45 CD11b CD117,CD44和Sca-1呈阳性表达,可连续表达MHC-Ⅰ,少量表达CD80,此外前者可少量表达MHC-Ⅱ,而后者几乎不表达MHC-Ⅱ.两者体外均能够向成骨、成脂方向分化.结论:通过低密度培养技术可简单方便的体外分离并扩增C57BL/6和BALB/c小鼠骨髓间质干细胞.两品系小鼠骨髓间质干细胞均易向成骨成脂分化,但在扩增能力、细胞表型上略有不同.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭振宇	中山大学附属第五医院泌尿外科	33	98	7.0	8.0
2	雷俊霞	中山大学中山医学院病理生理教研室	17	76	5.0	7.0
3	郑芹	中山大学中山医学院病理生理教研室	16	149	7.0	12.0