人胰岛素样生长因子Ⅰ基因修饰成肌细胞移植心肌梗死大鼠心肌细胞胰岛素样生长因子Ⅰ及端粒酶反转录酶mRNA的表达

• 作者: 刘晓明 卢永昕 米少华 粱振涛 荣书玲 高焱章
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 成肌细胞 基因修饰 类胰岛素生长因子 端粒酶反转录酶 心肌梗死
• 年，卷（期）: 2008,（51）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 10037-10040
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5154字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.51.004

摘要

目的:检测人胰岛素样生长因子Ⅰ基因修饰的鼠骨骼肌成肌细胞移植后,心肌梗死大鼠血浆及心肌组织内胰岛素样生长因子Ⅰ蛋白浓度的变化,以及心肌细胞内胰岛素样生长因子Ⅰ和端粒酶反转录酶mRNA水平的表达.方法:人胰岛素样生长因子Ⅰ基因修饰的鼠骨骼肌成肌细胞、未转染的止常鼠骨骼肌成肌细胞均由实验室前期制各.健康雄性SD大鼠90只,取12只作为假于术组,剩余大鼠结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,结扎后24 h存活36只,随机分为对照组和实验组,18只/组.造模后24 h.实验组在动物后肢局部分多点注射总量为0.1 mL的人胰岛素样生长因子Ⅰ基闪修饰的鼠骨骼肌成肌细胞悬液.(2～4)×1010L-1细胞;对照组和假手术组给予等量未转染的正常鼠骨骼肌成肌细胞悬液.应用ELISA法检测血浆和心肌组织胰岛素样生长因子Ⅰ的表达,RT-PCR检测心肌细胞中胰岛素样生长因子Ⅰ与端粒酶反转录酶mRNA水平.结果:①细胞移植后1,2,4周,假手术组血浆和心肌组织内鼠胰岛素样生长因子Ⅰ的表达无明显变化(P>0.05);与假手术组比较,实验组和对照组血浆中鼠胰岛素样生长因子Ⅰ的质量浓度均显著降低(P<0.01),心肌组织中鼠胰岛素样生长因子Ⅰ的含量均明显升高,于第2周达峰值(P<0.01),且实验组较对照组升高更为显著(P<0.01).②细胞移植后1,2,4周,假手术组和对照组大鼠血浆和心肌组织内均未检测到人胰岛素样生长因子Ⅰ的表达:实验组于第1周即表达人胰岛素样生长因子Ⅰ,含量显著高于其余两组(P<0.01).③细胞移植后第1周,实验组和对照组心肌细胞鼠胰岛素样生长因子1mRNA相对表达量明显高于假于术组(P<0.01):至第2周实验组达峰值,显著高于对照组(P<0.01),然后逐步下降.实验组和对照组心肌细胞端粒酶反转录酶mRNA的表达均逐渐呈升高趋势,且实验组更为显著(P<0.01).结论:人胰岛素样生长因子Ⅰ基因修饰的鼠骨骼肌成肌细胞植入心肌梗死大鼠体内1周后,能有效合成和分泌胰岛素样生长因子Ⅰ,明显促进心肌梗死早期大鼠心肌细胞鼠胰岛素样生长因子Ⅰ及端粒酶反转录酶mRNA的表达,同时可持续促进心肌及全身其他组织鼠胰岛素样生长因子Ⅰ的分泌.