Der p 2基因真核表达载体构建及其在小鼠树突状细胞中的表达

• 作者: 吴奎 毕玉田 王彦 王长征 钱桂生
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: Der p 2 载体构建 树突状细胞
• 年，卷（期）: 2008,（46）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 9184-9188
• 页数: 5页
• 分类号: R338
• 字数: 846字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.46.023

摘要

背景:树突状细胞是目前已知的最强大的抗原提呈细胞,已经被应用于免疫治疗的研究中.目的:构建Derp 2真核表达载体,并证明能在小鼠骨髓来源的树突状细胞中表达.设计、时间及地点:单一样本观察,实验于2005-05/12在解放军第二军医大学新桥医院全军呼吸疾病研究所完成.材料:C57BL/6小鼠;plambd-Derp 2购自美国HESKA公司;pCI-neo质粒为解放军第三军医大学新桥医院全军呼吸疾病研究所保存.方法:体外分离,培养小鼠骨髓来源树突状细胞.将原核表达质粒plambdDer p 2携带的Derp2全长cDNA切下,重组到真核表达质粒pCI-neo中,然后在脂质体介导下,将重组质粒转染到小鼠骨髓来源的树突状细胞,以末转染质粒和转染空白载体pCl-neo的树突状细胞为对照.主要观察指标:①pCI-neoDer p 2重组质粒结构鉴定.②并用反转录-聚合酶链反应、Western Blot检测Der p 2mRNA和蛋白表达.结果:测序证实构建的重组质粒中携带了Der p2的全长cDNA序列,且与GeneBank序列完全一致.反转录-聚合酶链反应和Western Blot检测结果提示,重组质粒转染的树突状细胞能表达Der p 2 mRNA和Derp2蛋白.结论:成功构建重组Der p 2基因真核表达载体,其转染树突状细胞后,能有效地表达于树突状细胞中.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王长征	解放军第三军医大学新桥医院全军呼吸疾病研究所	2	2	1.0	1.0
2	钱桂生	解放军第三军医大学新桥医院全军呼吸疾病研究所	17	63	5.0	6.0
3	毕玉田	解放军第三军医大学新桥医院全军呼吸疾病研究所	2	6	1.0	2.0
4	王彦	解放军第三军医大学新桥医院全军呼吸疾病研究所	8	9	1.0	3.0
5	吴奎	解放军第三军医大学新桥医院全军呼吸疾病研究所	1	0	0.0	0.0