手工组织显微切割后的快速DNA提取技术

• 作者: 唐泽立 罗泊涛 胡新荣 苏维勇 郑晓娟
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 组织固定 手工显微切割 蛋白酶K DNA提取
• 年，卷（期）: 2008,（24）
• 所属期刊栏目: 实验方法
• 页码范围: 4677-4679
• 页数: 3页
• 分类号: R373.77
• 字数: 3984字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.24.040

摘要

目的:为寻找一种操作简便、结果稳定可靠的组织处理及切片染色技术,尝试应用组织切片手工显微切割后快速提取DNA的方法,观察提取的DNA质、量是否能满足后续分子水平研究的需要.方法:实验于2004-07/2007-07在广东医学院病理学实验室完成.取广东医学院附属医院病理科提供的子宫颈癌石蜡包埋组织切片,将切片贴于载玻片长时间完全脱蜡后,用苏木精对细胞核进行淡染,再在倒转置显微镜下进行显微切割,将切割下的组织放入装有提取缓冲液的EP管中,整个过程不需更换EP管,不经过复杂的酚一氯仿抽提,采用细胞裂解并蛋白酶K消化的方法,快速、简便提取DNA.结果:经分光光度计检测提取的DNA浓度为0.14～5.25 g/L,A260A280值在1.6-1.8i PCR检测扩增出了预期长度为231 bp的目的片段.结论:手工组织显微切割后快速DNA提取法可以提供足量浓度的DNA,PCR反应模板结果稳定可靠,可满足后续分子水平研究的需要.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐泽立	广东医学院病理学教研室	17	42	4.0	5.0
2	罗泊涛	广东医学院病理学教研室	39	138	6.0	7.0
3	胡新荣	广东医学院病理学教研室	64	205	8.0	9.0
4	苏维勇	广东医学院病理学教研室	1	2	1.0	1.0
5	郑晓娟	广东医学院病理学教研室	4	22	3.0	4.0