与胎鼠胰腺干细胞共培养保护大鼠胰岛活性

• 作者: 余小舫 周汉新 张悦 张育森 李富荣
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺干细胞 胎鼠 共培养 胰岛 活性
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 2313-2316
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4576字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.12.027

摘要

目的:如何保护胰岛功能一直是胰岛移植中一个重要的研究内容.很多研究表明,干细胞除了自身具有较强的增殖分化能力之外,还可通过分泌一些细胞因子或者通过细胞一细胞接触、融合等方式促进损伤组织的修复,维持正常组织细胞功能.本实验利用胎鼠胰腺干细胞与大鼠胰岛共培养,观察其在保护胰岛功能、延长胰岛体外存活时间方面的作用.方法:实验于2006-07/2007-04在深圳人民医院中心实验室完成.①实验材料:选取体质量500 g、孕16 d的雌性SD大鼠1只,10周龄、体质量200～250 g SD大鼠20只,雌雄不限,均由广东省实验动物中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准.②实验方法:分离纯化孕16 d SD大鼠胎鼠的胰腺干细胞,并应用免疫细胞化学法及流式细胞术鉴定;采用胶原酶V消化、不连续密度梯度法分离纯化SD大鼠胰岛,并应用双硫腙鉴定.按随机对照表法将胰岛培养分单纯胰岛培养、胰岛与胰腺干细胞联合培养两组,15孔/组.③实验评估:观察胰岛形态变化及胰岛存活率,应用酶联免疫吸附法检测胰岛素分泌量并计算刺激指数.结果:①胎鼠胰腺干细胞培养传代3代后免疫细胞化学可见巢蛋白阳性细胞,流式细胞术测定巢蛋白阳性细胞含量占74.1%.②单纯培养组培养3 d时,胰岛生长状况较好,轮廓清楚,培养7 d时.胰岛结构变松散,边界不清,培养超过14 d后,胰岛结构均己破坏.联合培养组培养3 d时.胰岛生长良好,大部分胰岛悬浮生长,部分胰岛与贴壁干细胞松散黏附,培养7 d后大部分胰岛仍完整,培养14d时仍可见完整胰岛.③联合培养组培养7,14d时胰岛存活率明显高于单纯培养组(P＜0.01);④高糖刺激下联合培养组培养7 d时胰岛素分泌刺激指数明显高于单纯培养组(P＜0.01).结论:胎鼠胰腺干细胞与胰岛联合培养可以明显延长胰岛体外存活时间,并保持良好的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余小舫	暨南大学第二临床医学院普外科	63	442	12.0	18.0
2	张悦	暨南大学第二临床医学院普外科	19	73	5.0	7.0
3	周汉新	暨南大学第二临床医学院普外科	37	265	9.0	14.0
4	李富荣	暨南大学第二临床医学院临床研究中心	54	265	9.0	12.0
5	张育森	暨南大学第二临床医学院普外科	8	18	2.0	3.0