化学合成siRNA转染人羊膜的WISH细胞的效率检测

• 作者: 刘慧姝 郝荣增 马保华
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: WISH细胞 siRNA 转染 羊膜细胞
• 年，卷（期）: 2008,（16）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 3115-3118
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4588字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.16.032

摘要

目的:检索中国期刊全文数据库2005/2008相关文献显示,RNA干扰研究中,转染效率的高低直接决定siRNA 的表达效果,目前关于应用小分子干扰RNA对人羊膜WISH细胞转染效率的检测研究少见.实验应用化学合成siRNA转染人羊膜WISH细胞,通过流式细胞仪检测转染效率,并初步检测转染对细胞凋亡的影响.方法:实验于2007-03/12在广州医学院试验医学研究中心完成.①实验材料:实验中应用的人羊膜WISH细胞株购于中国科学院上海生命科学研究所.②实验方法:应用0,5,10,20,30 nmol/L化学合成的CY3-Negative siRNA转染人羊膜WISH细胞,转染后24 h应用荧光显微镜和流式细胞仪定性、定量评估其转染效率;20 nmol/L CY3-Negative-siRNA转染细胞24 h后,应用Annexin V-EGFP试剂盒检测细胞早期凋亡情况.结果:荧光显微镜显示,5,10,20,30 nmol/L CY3- Negative siRNA转染细胞内均可见红色荧光,对照组无荧光信号.20 ,30 nmol/L CY3-Negative siRNA 的转染效率明显高于5,10 nmol/L组(P < 0.05);20 nmol/L和30 nmol/L siRNA组转染效率差异不显著(P > 0.05).检测20 nmol/L Negative siRNA转染细胞24 h后的细胞早期凋亡情况,转染组与对照组细胞早期凋亡率分别为1.96 %和2.36 %,两组之间细胞早期凋亡率差异不显著.结论:①化学合成的siRNA可以成功转染人羊膜WISH细胞,转染后对细胞的早期凋亡率无影响.②20 nmol/L的siRNA即可获得理想的转染效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘慧姝	广州医学院第三附属医院广州市妇产科研究所	27	272	9.0	16.0
2	马保华	西北农林科技大学动物医学院	52	240	7.0	12.0
3	郝荣增	西北农林科技大学动物医学院	3	7	2.0	2.0