肝细胞生长因子基因转染脂肪细胞对移植组织工程脂肪存活的影响

• 作者: 刘婕婷 刘毅 哈小琴
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 组织工程脂肪 脂肪组织 移植 干细胞 骨髓细胞 肝细胞生长因子 转染 基因疗法
• 年，卷（期）: 2008,（42）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 8206-8210
• 页数: 5页
• 分类号: R329.5
• 字数: 7724字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.42.011

摘要

背景:在脂肪组织工程的研究中,若将种子细胞与支架材料复合后移植,则此组织工程脂肪将可替代颗粒脂肪.肝细胞生长因子可以促进血管生成、减少纤维组织增生.目的:观察肝细胞生长因子基因修饰骨髓间充质干细胞来源的脂肪细胞对大鼠组织工程脂肪移植存活的影响.设计、时间及地点:随机区组设计的动物实验,于2006-08,2007-07在解放军兰州军区兰州总医院医学科学实验中心完成.材料:纳入Wistar大鼠用于分离、培养骨髓间充质干细胞及植入细胞-支架复合物. 方法:①分离培养雄性大鼠骨髓间充质干细胞,诱导成脂,携带绿色荧光蛋白基因及肝细胞牛长因子基因的苇组腺病毒毒株分别转染脂肪细胞,流式细胞仪测定转染效率,应用酶联免疫吸附试验法测定培养上清中肝细胞生长因子的表达,将脂肪细胞接种于聚乳酸聚乙醇酸共聚物支架.②将75只Wistar雌性大鼠按随机数宁表法分为3组:脂肪细胞组、Ad-肝细胞生长因子转染组及Ad-绿色荧光蛋白转染组分别将脂肪细胞-聚乳酸聚乙醇酸共聚物、转染肝细胞生长因子基因脂肪细胞-聚乳酸聚乙醇酸共聚物、转染绿色荧光蛋白基因脂肪细胞-聚乳酸聚乙醇酸共聚物移植于大鼠腿部肌肉之间.主要观察指标:移植后3,7,14,28,60 d.每组各取5只大鼠麻醉后处死,取出移植物.电镜观察国;并行苏木精一伊红、油红O、Masson's染色,观察病理改变;同时用免疫组织化学法检测组织中肝细胞生长因子表达,观察并计数血管生成.结果:①骨髓间充质干细胞来源的脂肪细胞胞浆内富含丰富的脂滴,重组腺病毒感染复数=100时,携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒株转染脂肪细胞效率可达64.39%.②移植3,7,14 d时,Ad-肝细胞生长因子转染组移植物中肝细胞生长因子的表达高于其他组(P<0.05),且3 d达到高峰.③移植3,7,14,28,60d时,Ad-肝细胞生长冈子转染组移植物中血管生成高于其他组(P<0.05),且7d时血管增加的幅度最大.④移植28,60d时,Ad-肝细胞生长因子转染组坏死程度均小于其他组,电镜下脂肪细胞也多于其他组.结论:携带肝细胞生长因子基因的脂肪细胞在移植物中能够表达肝细胞生长因子,促进移植组织工程脂肪血管生成,进而促进移植组织的成活.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘毅	解放军兰州军区兰州总医院烧伤整形科	41	248	9.0	13.0
2	哈小琴	解放军兰州军区兰州总医院实验中心	9	33	4.0	5.0
3	刘婕婷	解放军兰州军区兰州总医院烧伤整形科	1	5	1.0	1.0