体外全骨髓法培养人骨髓间充质干细胞的生物学性状

• 作者: 侯艳秋 吴绍华 徐富翠 韩济南
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 体外培养 骨髓间充质干细胞 纯度 活性
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 骨髓间充质干细胞培养与分化
• 页码范围: 429-432
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4927字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.03.001

摘要

目的:现阶段多以动物为材料培养观察骨髓间充质干细胞的生长特性,对人骨髓间充质干细胞培养和生长特性的研究相对较少.为此实验培养人骨髓间充质干细胞,拟建立稳定的培养方法.方法:实验于2007-03/09在泸州医学院中心实验室省级重点实验室完成.①实验材料:6个月以上流产胎儿由泸州地区妇产医院提供,产妇及家属对实验知情同意,并经医院伦理委员会批准.②实验方法:应用全骨髓培养法培养人骨髓间充质干细胞,采用差速贴擘对细胞进行纯化.③实验评估:倒置相差显微镜下观察骨髓间充质干细胞形态及生物学特点,应用MTT法间接测定骨髓间充质干细胞活性.结果:①培养4 h,见骨髓间充质干细胞已开始贴壁,胞体由圆形变为不规则形或三角型,培养第2-4天,见间充质干细胞胞体向两端伸出二三个粗短突起,此时细胞形态渐变为梭型,呈成纤维细胞样生长,并聚集成集落;随着细胞的生长,贴壁细胞逐渐表现为脊梁状、旋涡状生长,细胞突起增长、增粗,并可发出更细的分支,突起间可相互交织成网.培养7 d时,见细胞铺满瓶壁面积的70%～80%,细胞排列紧密,此时骨髓间充质干细胞铺成单层.苏木精-伊红染色见细胞多为长梭型,有突起及分支,胞体较大,核一个,较大,呈椭圆,着色浅,可见多个的核仁,胞质浅红色.②骨髓间充质干细胞表面标志CD44免疫组织化学榆测,可见胞膜出现棕黄色阳性反应.③MTT法分别检测结果显示,2～6代细胞于酶标仪490 nm波长处吸光度值无明显差异,但均高于七八代细胞.结论:利用全骨髓培养法成功地培养出人胎儿骨髓间充质干干细胞,且第3～6代细胞纯度高、活性好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐富翠	泸州医学院组织胚胎学教研室	40	188	8.0	11.0
2	吴绍华	泸州医学院组织胚胎学教研室	28	131	8.0	10.0
3	韩济南	泸州医学院组织胚胎学教研室	2	4	2.0	2.0
4	侯艳秋		1	2	1.0	1.0