奶牛孕酮单克隆抗体的制备及其酶免疫测定方法的初步建立

• 作者: 冯晓琼 周虚 张乃生 张嘉保 曾文渊 杨正涛 邵谱
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 孕酮 McAb 免疫测定
• 年，卷（期）: 2008,（18）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 7659-7662
• 页数: 4页
• 分类号: S823.9+1
• 字数: 4545字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.18.076

摘要

[目的]制备奶牛孕酮McAb,建立孕酮酶免疫检测方法,为研制检测试剂盒奠定基础.[方法]用琥珀酰亚胺法将孕酮与钥孔血蓝蛋白(KLH)和卵清白蛋白(OVA)偶联制备完全抗原,免疫BalB/c小鼠,建立杂交瘤细胞株制备McAb,对McAb特异性、亚类、交叉反应性及相对亲和力等进行鉴定,筛选最佳McAb,建立酶免疫检测方法.[结果]获得3株杂交瘤1F6、2G6和2A11,腹水效价依次为1:1×106、1:1×105和1:8×104,其中1F6为IgG2b亚型,2G6和2A11为IgM亚型,3株McAb都能和游离孕酮发生特异性反应,相对亲和力1F6＞2G6＞2A11,其中1F6对雌二醇的交叉反应率小于0.01%.选用1F6与酶标孕酮建立ELISA检测方法,制作标准曲线,检测范围为0.5～100.0 ng/ml.[结论]该研究制备的单克隆抗体,可用于建立孕酮酶免疫检测方法,为奶牛孕酮水平的定量监测提供了较实用的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张嘉保	吉林大学实验动物中心	127	568	12.0	16.0
2	周虚	吉林大学畜牧兽医学院	89	492	11.0	18.0
3	杨正涛	吉林大学畜牧兽医学院	55	247	8.0	13.0
4	张乃生	吉林大学畜牧兽医学院	140	842	16.0	23.0
5	冯晓琼	吉林大学畜牧兽医学院	1	0	0.0	0.0
6	曾文渊	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	5	21	3.0	4.0
7	邵谱	吉林大学畜牧兽医学院	5	15	2.0	3.0