鼠抗人肥大细胞羧肽酶截短体抗体的制备与鉴定

• 作者: 梁晓东 陆田田 陈章权 黄震
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 生物学
• 关键词: 肥大细胞羧肽酶 小鼠 肥大细胞羧肽酶截短体
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 17-19
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 2373字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2008.12.007

摘要

目的 建立检测人肥大细胞羧肽酶(hMCCP)的双抗体夹心ELISA法,以hMCCP截短体免疫小鼠,制备鼠源性多克隆抗体.方法 PCR法扩增hMCCP-N118基因片段,克隆至pET28原核表达载体,转化大肠杆菌Rosseta(DE3).用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达,用Ni2+-NTA凝胶亲和层析纯化目的 蛋白.用纯化重组蛋白免疫小鼠,制备抗hMCCP-N118抗体.间接ELISA测定抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性.结果 hMCCP截短体在大肠杆菌中高效表达,用纯化的重组蛋白免疫小鼠,获得了鼠抗hMCCP-N118抗体,效价达1∶6 400,该抗体能特异结合hMCCP.结论 成功地制备了效价高、特异性好的鼠抗hMCCP截短体抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈章权		33	114	6.0	9.0
2	陆田田		12	42	4.0	6.0
3	黄震		17	91	6.0	9.0
4	梁晓东		14	35	3.0	5.0