重组VEGF165基因表达与活性检测

• 作者: 万敬枝 查文良 白育庭 闵清 高卉
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: VEGF165 基因克隆 表达 纯化 增殖
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 24-26
• 页数: 3页
• 分类号: R394.8
• 字数: 3378字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2008.08.009

摘要

目的 为血管内皮生长因子(VEGF165)生物学分子机制的研究奠定基础.方法 用RT-PCR法从人胎肝总RNA中逆转录扩增VEGF165,将其插入表达载体pET-32a(+) Vector中, 将测序鉴定正确的重组表达载体转化至E. Coli XL-Blue中表达,并用纯化蛋白刺激人脐静脉内皮细胞,检测其促增殖活性.结果 经异丙基硫代-βD-半乳糖苷(IPTG)诱导后,VEGF165(His)6得到有效表达, Western blot分析可以观察到相对分子质量为26 kD的诱导表达条带,该表达蛋白可与VEGF多克隆抗体发生特异性反应.用His-bind亲和层析纯化得到纯度较高的目的 蛋白,该蛋白可促进内皮细胞增殖.结论 基因工程技术可使大肠杆菌有效表达人VEGF165,并得到纯度较高、有增殖活性的VEGF165蛋白;此为进一步研究VEGF的生物学分子机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高卉	咸宁学院医学院	42	190	9.0	12.0
2	闵清	咸宁学院医学院	35	308	9.0	16.0
3	白育庭	咸宁学院医学院	46	375	10.0	17.0
4	万敬枝	咸宁学院医学院	15	83	4.0	9.0
5	查文良	咸宁学院医学院	14	86	6.0	9.0