温郁金ISSR-PCR反应体系的建立及条件优化

• 作者: 姜程曦 李校堃 梁广 汤晓闯 王晓慧 肖健
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 郁金 体系优化 ISSR-PCR
• 年，卷（期）: 2008,（22）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 9413-9415
• 页数: 3页
• 分类号: S188
• 字数: 3113字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.22.034

摘要

[目的]寻找一个可用于温郁金ISSR-PCR的最适宜反应体系.[方法]利用CTAB法提取基因组DNA,同时利用PCR扩增技术和方法,时引物、模扳DNA、Mg2+、dNTP、Taq聚合酶等反应条件进行优化.[结果]反应体系的最佳条件是总体积为25μl,其中Mg2+浓度(25mmol/L)2.2μl,Tap聚合酶(5 U/μl)0.4μl,引物浓度(20μmol/L)1.5μl,模板DNA(5ng/μl)1.5 μl,dNTP(2.5 mmol/L)2.2μl.10×PCRbuffer2.5μl;PCR扩增程序为:1个循环的94℃预变性5min;94 ℃变性35 s,相对应的引物退火温度退火1 min,72℃复性1.5min,共36个循环;最后72℃延伸10min.[结论]该体系是适合温郁金ISSR-PCR反应的最适宜体系,具有省时、经济、简便以及扩增条带清晰而稳定等特点,为今后温郁金遗传多样性的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖健	温州医学院药学院	26	134	7.0	9.0
2	王晓慧	温州医学院药学院	12	204	8.0	12.0
4	梁广	温州医学院药学院	15	147	5.0	12.0
5	汤晓闯	温州医学院药学院	3	45	3.0	3.0
11	姜程曦	温州医学院药学院	7	26	3.0	4.0