棉铃虫单核衣壳核型多角体病毒HaSNPV orf101的原核表达及抗体制备

• 作者: 周玥 徐旭士 李志远 邱小慧 钱丽莹
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 棉铃虫单核衣壳核型多角体病毒 orf101 克隆 表达 抗体
• 年，卷（期）: 2008,（35）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 15391-15393,15396
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 4021字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.35.048

摘要

[目的]摸索棉铃虫单核衣壳核型多角体病毒(HaSNPV)orf101编码蛋白原核表达条件并制备其多克隆抗体.[方法]根据HaSNPV-orf101序列,设计引物,引入适当的酶切位点,利用PCR扩增出基因片段并将其克隆至pGEM-T Easy载体,然后亚克隆至原核表达载体pGEX-KG,检测在不同条件下融合蛋白的表达产量及其折叠性质.原核表达产物经SDS-PAGE分离纯化,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.[结果]在IPTG诱导的条件下,融合蛋白GST- HA101可在大肠杆菌BL21中以包涵体形式高效表达,表达产物的大小为55.8 kDa.制备的多克隆抗体经1:8000倍稀释后用于Western Blot分析,获得特异性显色信号.[结论]原核表达蛋白及其多克隆抗体的获得为深入研究Ha101的基因功能打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐旭士	南京师范大学生命科学学院	22	432	11.0	20.0
2	周玥	南京师范大学生命科学学院	4	3	1.0	1.0
3	李志远	南京师范大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0
4	邱小慧	南京师范大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0
5	钱丽莹	南京师范大学生命科学学院	3	2	1.0	1.0