苏云金芽孢杆菌几丁质酶基因chiA在枯草芽孢杆菌中的分泌表达

• 作者: 孙金凤 宋光明 方慧英 沈微 诸葛健 诸葛斌 饶志明
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 苏云金芽孢杆菌 几丁质酶基因 枯草芽孢杆菌 分泌表达
• 年，卷（期）: 2008,（26）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 11242-11244,11247
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 3644字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.26.036

摘要

[目的]研究来源于苏云金芽孢杆菌的几丁质酶基因chiA在枯草芽孢杆菌中的表达情况.[方法]以苏云金芽孢杆菌染色体DNA为模板,PCR扩增获取几丁质酶基因chiA,将其与枯草芽孢杆菌表达载体pHSG连接,构建重组菌,经IPTG诱导后,检测培养液中的几丁质酶活性.[结果]扩增得到几丁质酶基因chiA大小为2.5 kb.构建的重组菌对底物[4-MU-(GIcNAc)3]显示出一定的水解活性.培养液酶活约为2.8 U/ml,而pHSG空质粒转化子在同样条件下其培养液没有明显酶活.该重组酶的最适pH值为6.5,最适反应温度为50℃,与苏云金芽孢杆菌自身产生的几丁质酶性质一致.[结论]几丁质酶基因chiA能在枯草芽孢杆菌中成功表达,表达产物可成功分泌到细胞外.