松江鲈鱼ISSR-PCR反应体系的建立及优化研究

• 作者: 徐建荣 郁建锋 韩晓磊 鲍峰
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 松江鲈鱼 正交试验 ISSR-PCR体系
• 年，卷（期）: 2008,（33）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 14420-14421,14465
• 页数: 3页
• 分类号: S917
• 字数: 2474字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.33.028

摘要

[目的]建立及优化松江鲈鱼ISSR-PCR的反应体系.[方法]采用ISSR-63引物,通过正交试验设计,分别对Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs和引物浓度等4种PCR原料进行优化,以确立松江鲈鱼的ISSR-PCR反应最佳体系,并通过温度梯度PCR,筛选适宜的退火温度.[结果]确定了松江鲈鱼的最适ISSR-PCR反应体系,20 μl反应体系中含2.5 mmol/L Mg2+,250 μmol/L dNTPs,0.25 μmol/L引物,1.0 U Taq DNA聚合酶,30 ng DNA模板及1×PCR buffer,确立退火温度为50.8 ℃.利用所建立的ISSR-PCR反应体系,通过对24份野生松江鲈鱼样本的检验,获得了清晰、重复性好、多态性高的DNA谱带.[结论]该研究为松江鲈鱼的遗传多样性分析及种质资源研究奠定了一定的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐建荣	常熟理工学院生物与食品工程系	73	552	14.0	19.0
2	韩晓磊	常熟理工学院生物与食品工程系	75	431	13.0	18.0
3	郁建锋	常熟理工学院生物与食品工程系	53	317	10.0	15.0
4	鲍峰	常熟理工学院生物与食品工程系	3	58	3.0	3.0