贵州石笔木DNA提取与ISSR-PCR反应体系的建立

• 作者: 何可权 唐荣华 王秀荣 赵杨
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 贵州石笔木 DNA提取 ISSR反应体系
• 年，卷（期）: 2008,（29）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 12607-12610
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 4812字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.29.031

摘要

[目的]利用ISSR技术对贵州石笔木的遗传多样性进行分析.[方法]以贵州石笔木种子、新鲜叶片和干燥叶片为试材,采用改良的CTAB法和SDS法提取贵州石笔木基因组DNA,并对提取DNA的浓度和纯度进行测定.通过单因子梯度试验,筛选出优化、稳定的ISSR-PCR反应体系.[结果] 利用CTAB法和SDS法从石笔木叶片中提取DNA时,鲜叶和干燥叶片提取的DNA质量和浓度略有差别,CTAB法提取的浓度稍大而蛋白残留稍多,SDS法提取的DNA量稍少但质量最高.而从种子中提取的DNA无论质量还是浓度均较差,但尚可满足ISSR分子标记试验.贵州石笔木的适宜ISSR-PCR反应体系为2 μl的10×Buffer,模板DNA 40 ng,dNTP 0.25 mmol/L,Taq酶1 U,引物0.2 μmol/L,总体积为20 μl. [结论]该ISSR技术体系适用于贵州石笔木遗传多样性分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王秀荣	贵州大学林学院	30	186	8.0	12.0
2	赵杨	贵州大学林学院	45	241	9.0	12.0