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摘要:
建立一种检测抗乳房炎疫苗抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,用于免疫后具有保护性效果的抗体水平.通过对细胞抗原制备、最佳抗原包被浓度的确定、抗原包被和封闭最佳条件确定、酶标抗体的最佳工作浓度及作用时间等反应体系的筛选和确定,建立了检测抗乳房炎疫苗抗体的间接ELISA方法.结果表明,金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、停乳链球菌(Streptococcus dysgalactiae)抗原最佳包被质量浓度分别为5 mg·L-1、10 mg·L-1、10 mg·L-1;包被条件为4 ℃过夜;用2%人血白蛋白作为封闭剂最佳封闭条件是37 ℃封闭30 min;酶标抗体最佳作用时间为30 min.结论攻毒试验表明,疫苗免疫后,血清中抗体滴度达到或超过免疫前2倍时,奶牛即具有较好的乳腺保护效力.这一指标可作为疫苗效力检验的标准.
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文献信息
篇名 ELISA检测奶牛乳房炎疫苗效果方法的建立
来源期刊 氨基酸和生物资源 学科 农学
关键词 间接ELISA 金黄色葡萄球菌 无乳链球菌 停乳链球菌
年,卷(期) 2009,(3) 所属期刊栏目 生物资源和氨基酸与人类健康
研究方向 页码范围 69-72
页数 4页 分类号 S85
字数 2788字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1006-8376.2009.03.019
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1 张捷 浙江万里学院生物与环境学院 34 105 5.0 9.0
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无乳链球菌
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生物资源
双月刊
1006-8376
42-1886/Q
大16开
武汉大学出版大楼604室(武汉市武昌咯珈山)
38-309
1975
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