猪戊型肝炎结构基因ORF2的克隆及其植物表达载体的构建

• 作者: 于婧 刘琦 夏善勇 曲娟娟 李杰 李柱刚 杨薇 相文华
• 来源期刊: 黑龙江农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 戊型肝炎病毒 ORF2 克隆 植物表达载体
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医
• 页码范围: 90-94
• 页数: 5页
• 分类号: S858.28
• 字数: 3860字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2767.2009.04.036

摘要

通过RT-PCR技术从一份猪粪中扩增并克隆了戊型肝炎病毒主要结构基因ORF2部分片段,大小为681 bp,将其克隆于pMD18-T载体.序列分析表明,与GenBank公布的序列一致.然后,将该基因亚克隆到植物表达载体p35S-2300-two-T-DNA-4×Ta1上,并将载体p2300上的CaMV35S启动子替换为E12启动子,构建成植物表达载体p2300-ORF2-E12.通过冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404中,获得了携带ORF2基因的根癌农杆菌菌株,为转基因植物工作奠定了基础.