SYBR Green荧光逆转录-聚合酶链反应检测流行性腮腺炎病毒基因

• 作者: 崔爱利 朱贞 王常银 王艳 许文波
• 来源期刊: 中国疫苗和免疫
• 学科: 医学
• 关键词: 流行性腮腺炎病毒 SYBR Green荧光逆转录-聚合酶链反应 基因定型
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-18
• 页数: 5页
• 分类号: R373.16
• 语种: 中文

摘要

目的 建立SYBR Green荧光逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transeription-Polymerase Chain Reation,RT-PCR)方法,用于检测流行性腮腺炎(腮腺炎)病毒(Mumps Virus,MuV)基因.方法 针对MuV小疏水蛋白(SmallHydrophobic Protein,SH)基因保守区域设计特异性引物.优化荧光定量RT-PCR反应体系与反应条件;并应用该方法对5株MuV进行基因检测.结果 SYBR Green荧光RT-PCR方法具有良好的敏感性和特异性,与其它呼吸道病毒均无交叉反应;检测敏感性为10 TCID50/0.2ml.SYBR Green荧光RT-PCR与传统RT-PCR检测MuV的敏感性相同,但大大缩短了检测时间.并可通过对SYBR Green荧光RT-PCR产物直接测序分析,进行基因型别鉴定.结论 SYBR Green荧光RT-PCR方法具有特异、敏感、快速等特点,为MuV的早期快速检测和基因型快速鉴定提供了一种新的检测技术.