利用毕赤酵母系统表达重组人生长激素的研究

• 作者: 万海同 刘文洪 朱振洪 葛立军 赵伟春
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组人生长激素 毕赤酵母 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 20-24
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3516字
• 语种: 中文

摘要

为了获得重组人生长激素在毕赤酵母中高表达的菌株,按毕赤酵母基因密码子偏爱性,人工合成hGH的全基因序列.该基因被克隆到穿梭质粒pPIC9K中,PEG1000介导转入毕赤酵母GS115细胞,通过G418筛选获得高拷贝转化子.在甲醇的诱导下.实现了hGH在毕赤酵母中的成功表达.通过发酵条件的优化.发酵上清中的表达量达1537 mg/L经过超滤和两步层析,重组蛋白的得率这35%,纯度为97%,相对分子质量测定表明重组蛋白的相对分子质量与理论值相近.N-端氨基酸测序证实hGH基因在毕赤酵母中获得正确的表达.