猪圆环病毒2型ORF2基因插入猪细小病毒VP2基因3'端对病毒样颗粒形成的影响

• 作者: 徐凯 徐志文 朱玲 熊丁杰 王印 王小玉 蒋清蓉 郭万柱
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细小病毒 VP2基因 插入位点 病毒样颗粒
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 95-100
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.2
• 字数: 4974字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.02.001

摘要

以猪细小病毒(PPV)四川分离株SC-1的VP2基因3'端为靶点,在第1215和1216位之间插入长约700 bp的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因片段,将重组后的PPV VP2-PCV2 ORF2克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,构建了重组质粒pEGFP.VO;经酶切和PCR鉴定后,采用脂质体介导法将重组质粒pEGFP.VO转染COS-7细胞,应用倒置荧光显微镜、电镜、免疫荧光以及生物信息学技术对表达产物进行观察分析.结果显示,重组质粒pEGFP.VO在COS-7细胞中得到表达,但在电镜下没有观察到病毒样颗粒.通过对PPV衣壳蛋白的三维结构分析及免疫荧光检测发现,PCV2 ORF2基因的插入位点位于PPVVP2基因的3'端,相应表达产物则位于VP2蛋白多肽的C端,且被其包裹在内,这可能影响了病毒样颗粒的形成,表明,PPV VP2基因3'端不适合外源基因插入构建重组病毒样颗粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱玲	四川农业大学动物生物技术中心	151	499	13.0	17.0
2	郭万柱	四川农业大学动物生物技术中心	166	1465	21.0	28.0
3	徐志文	四川农业大学动物生物技术中心	184	909	15.0	20.0
4	蒋清蓉	四川农业大学动物生物技术中心	4	13	3.0	3.0
5	王印	四川农业大学动物生物技术中心	104	558	13.0	18.0
6	徐凯	四川农业大学动物生物技术中心	7	42	3.0	6.0
7	熊丁杰	四川农业大学动物生物技术中心	3	9	2.0	3.0