瘤胃甲烷生成菌PCR反应条件的优化

• 作者: 张海涛 淡瑞芳 藏丽丽 魏小红 龙瑞军
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 甲烷生成菌 16SrDNA PCR反应条件 优化
• 年，卷（期）: 2009,（19）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 8898-8900
• 页数: 3页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3444字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2009.19.042

摘要

[目的] 优化适合于瘤胃甲烷生成菌的PCR反应体系.[方法] 以1.5周岁健康的藏系绵羯羊瘤胃内容物总DNA为模板,用特异性引物对甲烷生成菌16S rDNA保守序列进行PCR扩增,并通过改变PCR反应体系中的各参数,优化其PCR反应体系中的相关参数.[结果] PCR最优程序为:94 ℃预变性3 min;94 ℃变性45 s,51 ℃退火45 s,72 ℃延伸90 s,35个循环;72 ℃后延伸7 min.优化后的PCR反应体系为:5.00 μl 缓冲液,4.00 μl d-NTP,2.00 μl引物(前引物和后引物各1.00 μl),4.00 μl MgCl2,0.25 μl Taq DNA 聚合酶和1.00 μl 1∶ 100倍稀释的DNA模板,然后加水补足25.00 μl.[结论] 该研究为瘤胃甲烷生成菌功能的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龙瑞军	兰州大学草地农业科技学院甘肃草原生态研究所	128	3148	33.0	50.0
5	魏小红	甘肃农业大学生物技术工程学院	55	884	15.0	29.0
6	淡瑞芳		17	123	7.0	10.0
7	张海涛		19	111	6.0	9.0
8	藏丽丽	甘肃农业大学生物技术工程学院	1	3	1.0	1.0