酸刺激对大鼠颈动脉体Ⅰ型细胞酸敏感离子通道亚型表达的影响

• 作者: 周华 唐玉红 徐建国 李丹 郑煜 陈丽 陈海锋
• 来源期刊: 生理学报
• 学科: 医学
• 关键词: 颈动脉体 原代细胞培养 酸敏感离子通道
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 43-48
• 页数: 6页
• 分类号: R332|Q786
• 语种: 中文

摘要

本研究在原代培养大鼠颈动脉体(carotid body,CB)Ⅰ型细胞中检测酸敏感离子通道(acid-sensing ion channels,ASICs)业型ASIC1a和ASIC3的表达情况,并观察酸刺激对其表达的影响.实验取体重50～100 g Sprague-Dawley大鼠双侧CB进行原代培养,采用免疫荧光技术检测培养细胞有无CB Ⅰ型细胞特征性标记物酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的表达,以鉴定培养细胞的类型.采用免疫荧光双标技术,分别检测ASIC1a和ASIC3在TH阳性细胞中的表达情况.以两种酸性培养基(pH值分别为6.8和6.2)作用CB细胞24 h,pH7.3培养基为对照组,采用半定量RT-PCR技术检测ASIC1a和ASIC3 mRNA表达的变化.免疫荧光鉴定显示,原代培养的细胞93%以上是TH表达阳性细胞.免疫荧光双标显示,TH阳性细胞胞浆同时表达ASIC1a或ASIC3.RT-PCR结果显示,ASIC1a mRNA水平在不同酸刺激下变化不明显;ASIC3mRNA水平在pH6.8组变化不明显,而在pH6.2组显著低于pH7.3对照组和pH6.8组.上述结果提示,在转录水平上,酸刺激对CB Ⅰ型细胞小同亚型酸敏感离子通道的作用是不同的,对ASIC3具有下调作用,而对ASIC1a没有明显的调控作用.