大黄鱼病原哈维氏弧菌单克隆抗体的制备及其应用

• 作者: 姚嘉赟 尹文林 徐洋 沈锦玉 潘晓艺 郝贵杰
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大黄鱼 哈维氏弧菌 单克隆抗体 三抗体夹心酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 页码范围: 413-417
• 页数: 5页
• 分类号: Q789
• 字数: 3899字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.0000.2009.30413

摘要

用甲醛灭活哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)GYC1108-1制备免疫原免疫8周龄雌性BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对杂交瘤进行筛选,阳性克隆经2-3次亚克隆后,共获得5株针对GYC1108-1的单克隆抗体.选取1B7制备小鼠腹水抗体,其细胞上清及腹水效价分别为1∶3200和1∶32000.同样用灭活的哈维氏弧菌免疫新西兰大白兔,5次免疫后颈动脉采血,离心取血清,并用饱和硫酸铵法进行纯化,制备了兔抗哈维氏弧菌多克隆抗体,其ELISA效价为1∶51200.利用1B7单克隆抗体和兔抗哈维氏弧菌多克隆抗体以及山羊抗小鼠HRP酶标二抗,建立了检测哈维氏弧菌的三抗体夹心酶联免疫吸附试验(TAS-ELISA)方法.该方法对哈维氏弧菌的最小检出浓度为1×104个/mL.用该TAS-ELISA方法检测大黄鱼(Pseudosciaena crocea)样品,54尾患病大黄鱼中有45尾检出哈维氏弧菌,而14尾健康大黄鱼都没有检出哈维氏弧菌.由此可见,本试验建立的TAS-ELISA方法,可以用于患病大黄鱼哈维氏弧菌的快速诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝贵杰		52	439	13.0	17.0
2	沈锦玉		91	1304	20.0	32.0
3	徐洋		44	309	11.0	15.0
4	潘晓艺		67	785	16.0	25.0
5	尹文林		75	1203	20.0	31.0
6	姚嘉赟		37	255	9.0	14.0