平滑肌肌球蛋白轻链激酶及ATP结合位点突变体对ATP酶活性的调节作用

• 作者: 吕广艳 崔颖 曲淑贤 曹晶萍 王辉 谢策 赵莹 高颖 魏晓睛
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 平滑肌收缩 肌球蛋白轻链激酶(MLCK) 肌球蛋白 肌球蛋白Mg2+-ATP酶活性
• 年，卷（期）: 2009,（16）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3034-3037
• 分类号: Q71
• 语种: 中文

摘要

目的:探寻MLCK的非激酶活性区域对MLCK活性的影响,进一步阐明MLCK的非激酶活性在调节平滑肌收缩过程中的分子机制.方法:利用编码MLCK全长的pColdⅠ表达载体对其ATP结合位点进行定点突变,获得无激酶活性的MLCK突变体;应用Glycerol-PAGE鉴定肌球蛋白磷酸化水平;应用孔雀绿方法检测重组MLCK对肌球蛋白ATP酶活性的影响.结果:MLCK/ATP(突变型)失去磷酸化肌球蛋白轻链的激酶活性;重组MLCK(野生型)和MLCK/ATP(突变型)均可以在非钙条件下激活非磷酸化肌球蛋白Mg2+-ATP酶活性,抑制磷酸化肌球蛋白的Mg2+-ATP酶活性,而且激活与抑制作用均随着MLCK浓度的增加而增大,但二者对肌球蛋白的ATP酶活性的作用没有显著差异(P>0.05).结论:平滑肌肌球蛋白轻链激酶及ATP结合位点突变体具有激活非磷酸化肌球蛋白ATP酶活性的作用.