变异链球菌、表兄链球菌复合防龋DNA疫苗的研制

• 作者: 孙静华 杨雪超 樊明文 牛玉梅 许庆安
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 龋齿 疫苗 DNA 链球菌 口腔
• 年，卷（期）: 2009,（32）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2286-2291
• 页数: 6页
• 分类号: R5
• 字数: 4379字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2009.32.018

摘要

目的 构建包含变异链球菌和表兄链球菌两种致龋菌的主要抗原片段的复合防龋DNA疫苗,以期增强DNA防龋疫苗对表兄链球菌的抑制作用.方法 PCR获得表兄链球菌OMZ176GTF-1的CAT区,克隆至靶向防龋DNA疫苗pGJA-P/VAX中,构建编码变异链球菌PAc、GLU基因序列和表兄链球菌CAT基因序列的复合防龋DNA疫苗pGJGAC/VAX,转染CHO细胞系检测其表达.重组质粒及对照质粒分别经股四头肌注射和鼻腔滴注免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测血清和唾液中的特异性抗PAc,抗GLU和抗CAT抗体水平.重组质粒及对照质粒经鼻腔滴注免疫分别定植了变异链球菌和表兄链球菌的Wistar大鼠,龋齿记分评价防龋疫苗的龋齿保护效能.结果重组质粒pGJGAC/VAX构建成功.免疫小鼠后实验组小鼠血清和唾液抗PAc、抗GLU和抗CAT抗体水平均显著高于空载体对照组(P<0.01).血清特异性抗CAT抗体水平最高值在肌肉免疫组第8周和黏膜免疫组第10周时出现,分别为62.13μg/ml和11.43 μg/ml;唾液特异性抗CAT抗体水平最高值在肌肉免疫组第8周和黏膜免疫组第10周时出现,分别为0.67%和0.80%.大鼠龋齿保护实验结果显示在变异链球菌和表兄链球菌定菌鼠中实验组釉质龋(E),牙本质浅龋(Ds)和牙本质中龋(Dm)均显著低于pVAX1免疫组(P<0.05),实验组Ds和Dm均低于pGJA-P/VAX免疫组,但两组间E差异没有统计学意义(P>0.05).结论 复合防龋DNA疫苗构建成功,可在真核细胞中正确表达,动物实验证实能有效地诱导黏膜和系统体液免疫反应,并增强了DNA防龋疫苗对表兄链球菌的抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨雪超	武汉大学口腔生物医学工程教育部重点实验室	6	70	4.0	6.0
2	樊明文	武汉大学口腔生物医学工程教育部重点实验室	232	2339	23.0	36.0
3	牛玉梅	哈尔滨医科大学口腔医学院牙体牙髓病科	71	244	9.0	12.0
4	许庆安	武汉大学口腔生物医学工程教育部重点实验室	10	62	6.0	7.0
5	孙静华	武汉大学口腔生物医学工程教育部重点实验室	3	12	2.0	3.0