H5N1亚型禽流感病毒血凝素蛋白单链抗体基因的克隆及表达

• 作者: 夏咸柱 李群 杨松涛 王化磊 王承宇 郝淑美
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 血凝素蛋白 单链抗体 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 63-67
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659
• 语种: 中文

摘要

构建并表达H5N1亚型禽流感病毒血凝素蛋白单链抗体,为禽流感靶向治疗药物的研制制备靶向载体.从分泌血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞株中提取mRNA,采用RT-PCR法扩增出重链和轻链可变区基因,通过SOEPCR法将重链和轻链通过Linker连接起来构建单链抗体基因,将获得的单链抗体基因装入原核表达载体pET28a(+)中,构建重组质粒并表达,以Western blot鉴定单链抗体的特异性.结果成功构建了单链抗体基因,全长714bp,经原核表达,所构建的单链抗体可与H5亚型禽流感病毒HA蛋白特异结合,为禽流感的靶向治疗奠定了基础.