食蟹猴胚胎干细胞的培养及向神经细胞诱导分化

• 作者: 关云谦 吴迪 张愚 徐艳玲 朱宛宛 李宁 邹春林
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 生物学
• 关键词: 食蟹猴 胚胎干细胞 细胞培养 神经分化
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 709-715
• 页数: 7页
• 分类号: Q254
• 字数: 4169字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立食蟹猴胚胎干细胞系体外培养体系,并诱导其向神经细胞分化,为在体移植实验奠定基础.方法 用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,长期培养食蟹猴胚胎干细胞.在无血清培养基中添加小鼠重组Noggin的方式诱导其向神经细胞分化,并对分化各阶段细胞进行免疫组化染色检测分化效果.结果 食蟹猴胚胎干细胞在饲养层上成克隆样生长,可以长期扩增超过20代并保持胚胎干细胞的特性.诱导向神经细胞分化约14 d,即可形成呈玫瑰花环样的神经前体细胞结构,可见大量Nestin阳性细胞,及部分Tuj-1阳性细胞;分化约21 d时,可见大量Nestin阳性细胞以及大量Tuj-1阳性细胞;分化超过35 d,可见GFAP阳性细胞,而Tuj-1阳性细胞减少.结论 成功建立食蟹猴胚胎干细胞的培养体系,在此基础上诱导其分化可获得大量神经前体细胞,尤其是早期神经细胞.