以人皮肤成纤维细胞作为饲养层细胞培养人胚胎干细胞

• 作者: 冯劢 刘雄昊 吴奔 喻姣玲 夏家辉 李卓 杨俊林 梁德生 潘盛 谭杨 邬玲仟 高庭
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 人胚胎干细胞 人皮肤成纤维细胞 饲养层细胞
• 年，卷（期）: 2009,（16）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3001-3005
• 分类号: R329.2
• 语种: 中文

摘要

目的:比较人皮肤成纤维细胞(human dermal fibroblasts,HDFs)与小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblasts,MEFs)的增殖能力及研究人皮肤成纤维细胞作为饲养层支持人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)未分化生长的能力.方法:利用组织贴壁法从人皮肤中分离出HDFs,通过细胞形态的观察和生长曲线的绘制比较HDFs与MEFs的体外增殖能力.将HDFs作为饲养层细胞与hESCs共培养,传代12代后,检测hESCs碱性磷酸酶(AKP)、表面特异性标志及胚胎干细胞特异性转录因子.结果:HDFs可连续传代培养15代以上,10代以下的HDFs增殖迅速,而MEFs自第4代起,增殖能力就明显下降;hESCs在HDFs饲养层上可传代培养12代以上,克隆边界清晰,细胞排列紧密,碱性磷酸酶、表面标志物检测均呈阳性,表达了hESCs特异性转录因子.结论:HDFs比MEFs具有更强的增殖能力;HDFs可作为培养hESCs的饲养层细胞.