毛细管电泳检测肺癌基因突变的方法学研究

• 作者: 刘勇 刘圆圆 王娟 王荣 谢华 贾正平 辛晓婷 马骏 高岚
• 来源期刊: 分析测试学报
• 学科: 化学
• 关键词: 毛细管电泳 基因突变 肺癌 聚环氧乙烷 纯化
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 379-384
• 页数: 6页
• 分类号: O657.8|Q754
• 字数: 4024字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-4957.2009.04.001

摘要

建立了一种毛细管电泳快速高效检测聚合酶链反应(PCR)扩增产物以及限制性内切酶酶切产物的方法,使其更好地用于基因诊断.以聚环氧乙烷(poly(ethylene oxide),PEO)为筛分介质,用涂层的毛细管柱(37 cm×75 μm,有效长度27 cm)分离pUC19 DNA/MspⅠ(HpaⅡ) Marker标准DNA片段.考察了筛分介质的质量浓度、pH值、毛细管柱的温度和运行电压.在1×TBE (pH 8.2)电泳液、电压15 kV、温度15 ℃,于10 min内成功分离了Marker标准DNA片段.该方法快速、灵敏、准确,用于临床76例肺癌患者正常组织和肿瘤组织p53基因和ras基因点突变情况的检测,结果满意.