体外RNA干扰抑制RANKL表达对成骨细胞功能的影响

• 作者: 于正红 司文腾 高坤 高延征
• 来源期刊: 河南医学研究
• 学科: 医学
• 关键词: 核激活因子受体配体 RNA干扰 大鼠 成骨细胞 基因沉默
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: R739
• 字数: 3890字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-437X.2009.01.001

摘要

目的:观察用RNA干扰的方法抑制大鼠成骨细胞核激活因子受体配体(Ligand of receptor activator of NF-kB.RANKL)mRNA表达后,成骨细胞RANKL、OPG蛋白表达和Ⅰ型胶原表达、细胞增殖能力的时间变化规律.方法:设计4条RANKL序列特异性小干扰RNA(siRNA),用Lipofectamin2000转染成骨细胞,采用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测RANKL的表达.筛选出最有效的干扰序列,并用Western blot检测转染后1、2、3、5、7天RANKL、OPG蛋白的表达,同时观察成骨Ⅰ型胶原表达、细胞增殖能力在相同时间点的变化.结果:对siRNA中有一对可使大鼠成骨细胞的RANKLmRNA水平下降89%.用最佳siRNA转染后1、2、3、5、7天.与空白对照组相比,RANKL蛋白表达率分别为59.1%、39.5%、26.6%、40.0%、57.3%(P<0.05),OPG蛋白表达率较空白对照组降低,但差异不具有显著性(P>0.05).成骨细胞的Ⅰ型胶原表达、增殖能力在相同时间点较空白对照组降低,差异也不具有显著性(P>0.05).结论:靶向siRNA可显著下调成骨细胞RANKL表达,同时对OPG表达及成骨细胞的主要功能无显著影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高坤	河南省人民医院骨科	49	310	10.0	16.0
2	高延征	河南省人民医院骨科	130	615	12.0	18.0
3	司文腾	河南省人民医院骨科	2	5	1.0	2.0
4	于正红	河南省中医学院第二附属医院骨科	1	5	1.0	1.0