人脑钠肽融合蛋白(HSA-(BNP)2)在毕赤酵母中的发酵条件及纯化研究

• 作者: 丁月娣 刘天会 张莲芬 金坚 陈蕴
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 工学
• 关键词: 脑钠肽 融合蛋白 毕赤酵母 发酵优化 纯化
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 113-117
• 页数: 5页
• 分类号: TQ92
• 语种: 中文

摘要

对毕赤酵母工程菌GS115/pPIC9K-HSA-(BNP)2的发酵条件进行了优化,并对表达产物HSA-(BNP)2融合蛋白的纯化工艺进行了摸索.研究表明,菌体生长28 h时菌浓较高,可进行诱导;同时,在2%甲醇浓度、培养液浓缩1.5倍、诱导表达72 h时融合蛋白产量可达185 mg/L.发酵液超滤浓缩后经Q Sepharose强阴离子交换层析和Superdex 75凝胶过滤层析,获得的融合蛋白纯度为93%,Western blot分析其既具有BNP免疫原性又具有HSA免疫原性.毕赤酵母工程菌GS115/pPIC9K-HSA-(BNP)2经发酵优化后能高效表达HSA-(BNP)2融合蛋白,经两步层析获得的融合蛋白满足后期药效学与药代动力学实验的要求,为后续研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张莲芬		32	395	12.0	19.0
2	金坚		196	1025	16.0	22.0
3	陈蕴		85	685	13.0	23.0
4	丁月娣		5	23	3.0	4.0
5	刘天会		1	0	0.0	0.0