抗鸡传染性支气管炎病毒核蛋白单链抗体的构建及初步鉴定

• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性支气管炎病毒 核蛋白 单链抗体 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 800-803,832
• 页数: 5页
• 分类号: S852.3
• 字数: 3286字
• 语种: 中文

摘要

为了构建鸡传染性支气管炎病毒(IBV)核蛋白(N)单链抗体(scFv),本研究通过提取杂交瘤细胞株6H3的总mRNA,采用RT-PCR法扩增出抗IBV N蛋白抗体的重链和轻链可变区基因,利用重叠延伸PCR将其重链和轻链通过一条寡核苷酸链连接起来扩增了单链抗体基因,并将其克隆于原核表达载体pET-30a,构建重组质粒,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达.对表达产物进行纯化复性后,用夹心ELISA和western blot检测表明scFv可与传染性支气管炎病毒核蛋白发生特异性结合.