采用一种新型RNAi载体培育转基因高直链淀粉马铃薯

• 作者: 张玉宝 张金文 王亚军 王金牛 谢忠奎 郭志鸿 陈正华
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: RNAi nos终止子 反向重复序列 高直链淀粉马铃薯
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 809-815
• 页数: 7页
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2009.00809

摘要

采用PCR技术分别克隆nos终止子、烟草axil内含子和烟草ubi.u4启动子,亚克隆部分与马铃薯Sbel同源、部分与Sbe2同源的融合基因SIII,构建具有"ubi.u4启动子-反向.SIII-反向nos终止子-axil内含子-正向nos终止子"结构的异源3'端UTR反向重复序列型RNAi载体pCUSNI,采用农杆菌介导法转化马铃薯品种陇薯3号、甘农薯2号和大西洋,获得了16个转基因植株,其中14个的块茎直链淀粉含量大幅度增加,表观直链淀粉含量介于53.80%～85.33%;但随着直链淀粉含量的升高,转基因马铃薯淀粉含量下降.半定量RT-PCR分析表明,在直链淀粉含量超过80%的转基因株系中检测不到Sbe1和Sbe2基因mRNA的积累.结果表明,异源3'端UTR反向重复序列型RNAi载体pCUSNI能够高频、高效地同时抑制马铃薯Sbe1和Sbe2基因的表达,是一个优良的RNAi载体.以载体pCUSNI为基础,再以植物的其他基因为靶,只需在pCUSNI的BamH Ⅰ和Xba Ⅰ位点之间插入干涉片段替换SIII即可完成载体构建,而不必构建靶标基因的反向重复序列,使载体制备迅速便捷.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张金文	甘肃农业大学农学院	110	1086	18.0	25.0
2	谢忠奎	中国科学院寒区旱区环境与工程研究所	45	710	17.0	25.0
3	郭志鸿	中国科学院寒区旱区环境与工程研究所	12	58	4.0	7.0
4	王亚军	中国科学院寒区旱区环境与工程研究所	62	844	17.0	27.0
5	张玉宝	中国科学院寒区旱区环境与工程研究所	7	32	3.0	5.0
6	王金牛	中国科学院寒区旱区环境与工程研究所	7	60	3.0	7.0