贝类中诺如病毒SYBR Green I实时定量RT-PCR检测方法研究

• 作者: 周德庆 曹慧慧 苏来金 马丽萍
• 来源期刊: 中国食品学报
• 学科: 工学
• 关键词: 贝类 诺如病毒 SYBR Gieen I荧光染料 荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 分析与检测
• 页码范围: 157-163
• 页数: 7页
• 分类号: TS2
• 字数: 3822字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-7848.2009.06.026

摘要

将诺如病毒(Norovim8es,NV8)RT-PCR特异产物纯化后与pGEM-T裁体连接并转化至感受态细胞DH5α,经测序鏊定.提取阳性克隆质粒DNA,梯度稀释后作为实时荧光定量PCR的标准质粒.使用SYBRGreen I染料建立检测贝类中NV8的实时荧光定量RT-PCR方法.结果表明,本方法标准曲线线性范围可达6个数量级(108～103拷贝),R2为O.9983,比常规RT-PCR方法敏感100倍,且特异性良好,与贝类中的轮状病毒、甲肝病毒均不反应;批内和批间重复性良好,变异系数(CV)分剐在0.28%～4.03%和1.47%～5.53%范围.该方法具有简便、敏感、高效、稳定等优点,可用于水产品中NV8的定量检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏来金	农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所	3	25	3.0	3.0
3	周德庆	农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所	5	235	5.0	5.0
6	马丽萍	农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所	1	7	1.0	1.0