雌激素受体2对前列腺癌细胞系PC-3M增殖的影响

• 作者: 李峰 李帅 李扬 汲坤 赵雪俭 邵月婷 郭丽荣
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 受体,雌激素 PC-3M细胞 真核表达
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 656-660
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 4397字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2009.04.007

摘要

目的: 构建带有人雌激素受体2(ESR2)全长cDNA的重组质粒pcDNA3.1-hERβ,转染人前列腺癌PC-3M细胞株,观察ESR2对细胞增殖能力的影响.方法: RT-PCR方法从人正常卵巢组织中获取ESR2全长cDNA,利用基因重组技术与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建重组质粒pcDNA3.1-hERβ;瞬时转染前列腺癌PC-3M细胞株,应用细胞计数、MTT法及流式细胞术检测细胞增殖能力的改变;半定量RT-PCR法及Western blotting法分别检测增殖相关基因cyclinD1和 P21Cip1 mRNA及蛋白表达.结果: DNA测序结果显示扩增的ESR2序列与GenBank(NM_001437)所公布的序列完全一致.重组质粒pcDNA3.1-hERβ瞬时转染人PC-3M细胞48 h后,与质粒对照组相比:RT-PCR法及Western blotting法显示,ESR2基因在mRNA水平和蛋白水平的表达均明显增加;细胞计数及MTT结果发现,细胞数目减少,细胞增殖活性下降(P<0.01);流式细胞实验显示,G0/G1期细胞比例增加(P<0.05),S期及G2/M期细胞比例减少(P<0.05);RT-PCR及Western blotting结果还发现cyclinD1的表达减弱,而P21Cip1的表达增强.结论: 成功构建pcDNA3.1-hERβ重组质粒;带有ESR2全长基因的重组质粒转染PC-3M细胞后,细胞的增殖活性受到抑制;RSR2可能通过影响细胞增殖相关基因cyclinD1和 P21Cip1的表达抑制细胞的增殖.