人胰岛素样生长因子-1的原核表达和纯化

• 作者: 俞昌喜 廖联明 杨渐 许盈
• 来源期刊: 中国生化药物杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 胰岛素样生长因子-1 融合蛋白 重组
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 226-229
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3244字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建高表达、易纯化的人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)工程菌.方法 采用pET32a(+)质粒构建带羟胺裂解部位的表达栽体,转入大肠杆菌DH5α进行诱导表达.表达产物经镍离子-亲和柱色谱分离后进行羟胺裂解.裂解产物纯化后用MALDI-TOF-MS法测定相对分子质量(Mr).结果 重组质粒序列完全正确.工程菌可表达预计Mr的融合蛋白,经Western blot证实有hIGF-1抗原活性.经镍离子-亲和柱色谱分离、羟胺裂解后得到的肤的Mr为7 640,和理论值相符.结论 成功构建了表达bigF-1的工程菌,为开发hIGF-1奠定了基础.