人真皮来源淋巴管内皮细胞的流式细胞仪分选和生物学特点

• 作者: 刘宁飞 胡学庆 蒋朝华
• 来源期刊: 组织工程与重建外科杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 流式细胞仪 淋巴管内皮细胞 细胞分选 细胞培养
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 267-271
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.1+1
• 字数: 3916字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2009.05.008

摘要

目的 用流式细胞仪分选培养人真皮来源淋巴管内皮细胞,研究其生物学特点.方法 采用中性蛋白酶及胶原酶消化包皮组织获得真皮细胞悬液,应用流式细胞仪检测和分选 Podoplanin+和 Podoplanin-/CD34+细胞,所获细胞进行体外培养.传代细胞进行免疫荧光及RT-PCR方法 检测LECs特异标志的表达,低密度脂蛋白吞噬、鼠尾胶原三维培养检测功能特点,MTT法及氚标记法测定细胞增殖周期和低氧条件对其增殖的影响.结果 人真皮细胞中CD31+,CD34+和 Podoplanin+细胞所占比例分别是6.0%,4.4%和1.4%.Podoplanin+和CD34+细胞在单层培养时形成内皮细胞典型的铺路石样外观,表达内皮细胞特异性标志CD31及吞噬Dil-Ac-LDL和三维培养微管形成功能.Podoplanin+细胞表达淋巴管内皮细胞特异性标志Prox-1,Ang2和VEGFR-3,和CD34+细胞间具有显著性差异.两组细胞生长曲线相似均于接种至培养板后的3～5d逐渐进入对数生长期,接种后的6～8d均进入停滞期.在缺氧环境下,氯化钴浓度为50μM和100 μM时刺激细胞增殖,当浓度大于200 μM细胞增殖明显受到抑制.结论 应用流式细胞仪可以富集人真皮来源淋巴管内皮细胞和血管内皮细胞,尽管两者表达特异性分子标志不同,其在三维培养和缺氧条件下生长特点相似.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡学庆	上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科	5	12	2.0	3.0
2	刘宁飞	上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科	21	112	6.0	9.0
3	蒋朝华	上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科	22	67	5.0	7.0