荷花ISSR-PCR反应体系的建立及优化

• 作者: 何天友 刘颖嘉 胡迪科 荣俊冬 郑郁善 黄宇
• 来源期刊: 亚热带农业研究
• 学科: 农学
• 关键词: 荷花 ISSR 反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 284-288
• 页数: 5页
• 分类号: S682.32
• 字数: 3085字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0925.2009.04.017

摘要

以荷花叶片提取的基因组DNA为材料,通过对影响ISSR-PCR扩增效果的一些因素,如dNTPs浓度、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶用量、引物用量、模板DNA用量以及退火温度等进行筛选和优化,确立了可用于荷花ISSR-PCR分析的最适宜的PCR反应体系:20 μL PCR反应体积含0.4 mmol·L-1 dNTPs、3.5 mmol·L-1 Mg2+、1.5 U Taq DNA聚合酶、0.4 μmol·μL-1 引物、3 ng模板DNA.PCR扩增程序为:94 ℃预变性2 min,94 ℃变性30 s,54.5 ℃退火30 s,72 ℃延伸1 min,45个循环,最后72 ℃延伸7 min,置4 ℃保存.应用该ISSR体系对6份荷花种质进行了扩增,证实了该体系的适用性和稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑郁善	福建农林大学工业原料林研究所	303	2600	26.0	39.0
5	荣俊冬	福建农林大学工业原料林研究所	178	835	14.0	19.0
6	黄宇	福建农林大学工业原料林研究所	12	95	7.0	9.0
7	何天友	福建农林大学工业原料林研究所	110	409	10.0	14.0
11	刘颖嘉	福建农林大学工业原料林研究所	6	41	3.0	6.0
15	胡迪科	福建农林大学工业原料林研究所	3	12	2.0	3.0