功能化硅壳荧光纳米载体在A549细胞中的细胞标记

• 作者: 姬曼 李峰 李睿 杨慧 蔡青 赵焕英 邓君 隋雷鸣 高尔静
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: SiO2纳米粒子 生物材料 细胞相容性 细胞标记
• 年，卷（期）: 2009,（8）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1486-1490
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 5559字
• 语种: 中文

摘要

背景:硅壳荧光磁性纳米载体表面功能化后不仅仍具备荧光性、磁性功能,而且还具有携药和携基因潜能,片有良好的生物相容性,可实现对细胞的标记功能.目的:制备Fe3O4@SiO2(FITC)-3-异氰基丙基三乙氧基硅烷-聚酰胺-胺树状大分子(G2.O)纳米颗粒型多功能纳米载体,并评估纳米载体标记A549细胞的能力,在细胞内的分布及与细胞的生物相容性.设计、时间及地点: 观察性实验,于2006-06/2007-06在首都医科大学化学生物学与药学院合成了纳米载体,2007-07/2008-07在首都医科大学神经科学研究所完成了复合纳米载体的生物评估.材料和方法:15 μ L 3-异氰基丙基三乙氧基硅烷和195.12 mg聚酰胺-胺树状大分子(G2)在无水甲醇环境中反应24 h,得到目的产物3-异氰基丙基三乙氧基硅烷-聚酰胺-胺树状大分子:然后将合成好的Fe3O4@SiO2(FITC)与3-异氰基丙基三乙氧基硅烷-聚酰胺-胺树状大分子在甲醇溶液环境下,避光搅拌48 h,用水磁铁分离固体,并经无水乙醇沈后真空干燥,得到最终目标载体.主要观察指标:透射电镜观察纳米载体的大小和细胞内分布,Zeta电位测定其生理情况下电荷情况,激光共聚焦显微镜下观察FITC、DAPI和Lysotracker Blue细胞染色情况以评估载体在细胞内定位,CCK-8评估其对细胞毒性作用,流式细胞计数法评价其标记细胞的效率.结果:透射电镜分析表明,修饰的硅壳纳米载体大小约为80 nm,pH=7.4,纳米载体zeta电位为+23.93 mV.透射电镜和激光共聚焦显微镜结果表明纳米粒主要存在细胞浆中,且能被溶酶体吞噬.CCK-8结果显示纳米载体的浓度高达1 g/L时仍无明显的毒件作用.流式细胞计数结果表明,细胞摄取纳米粒呈浓度和时间依赖性.结论:成功制备了硅壳结构的荧光磁性纳米载体,主要分布在细胞浆中,且细胞相容性好.