油菜柠檬酸合酶基因的克隆及在逆境下的表达

• 作者: 刘贵华 华玮 王新发 王汉中 童晋 詹高淼
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 油菜 柠檬酸合酶 表达模式 胁迫
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 33-40
• 页数: 8页
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2009.00033

摘要

柠檬酸合酶是植物多种代谢途径的限速酶,及代谢变化的标志酶.为了解油菜柠檬酸合酶基因的生理功能,以甘蓝型油菜叶片cDNA为模板,设计特异性引物,获得一编码柠檬酸合酶基因的cDNA序列,伞长1 659 bp,ORF区含476个氨基酸残基,序列比对显示其蛋白序列与拟南芥有较高的同源性(96.0%),氨基末端含一线粒体靶信号.聚类分析表明,油菜柠檬酸合酶基因与其他植物内该基因高度同源.对油菜幼苗进行植物生长调节物质、高温和低温、强光照和弱光照、盐、菌核病、干旱和水渍等处理,采用半定量PCR法对油菜叶片柠檬酸合酶基因的表达模式进行检测,发现在盐胁迫、暗光和强光的处理下,柠檬酸合酶基因的表达基本没有变化;在水渍、干旱、IAA和6-BA胁迫下,其表达有所升高,但出现峰值的时间不同,ABA对表达模式的影响与IAA相反;感染菌核病后其表达降低;对GA3的应答呈鞍型.对部分处理采用荧光定量PCR验证,其结果与半定量PCR结果皋本一致.