α-葡萄糖苷酶基因序列分析及真核表达载体构建

• 作者: 张云开 李玮 梁智群 王继瑞 覃晓娟
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: Aspergillus niget(CU-1) α-葡萄糖苷酶基因 基因序列分析 真核表达
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3006字
• 语种: 中文

摘要

目的:Aspergillus niger(CU-1)菌株α-葡萄糖苷酶基因(aNA)克隆并对其序列进行分析,构建该基因的真核表达载体.方法:设计合成的一对特异性引物,采用PCR以总DNA为模板,扩增得到DNA片段(01);采用RT-PCR方法扩增得到DNA片段(D2).将DNA片段D1和D2转入大肠杆菌中并进行了序列测定,序列进行BLAST比对分析.将α-葡萄糖苷酶基因的cDNA片段与表达载体pGAeZαA连接,构建重组表达载体.结果:基因agdA大小为3 127bp,含有3个外显子和4个内含子.该基因的cDNA序列大小为2 958bp,包含完整的编码框,编码985个氨基酸.agdA基因序列与已发表的α-葡萄糖苷基因序列同源性达99%,其中有6个位置的碱基发生了变化.已成功构建重组表达载体pGAPZαA-agdA.结论:Aspergillius niger(CU-1)菌株α-葡萄糖苷酶基因序列分析及重组表达载体pGAPzαA-agdA的构建为在毕赤酵母中表达Aspergillus niger(CU-1)菌株的α-葡萄糖苷酶奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玮	广西大学生命科学与技术学院	7	44	4.0	6.0
2	梁智群	广西大学生命科学与技术学院	90	686	14.0	20.0
3	张云开	广西大学生命科学与技术学院	38	226	8.0	13.0
4	王继瑞	广西大学生命科学与技术学院	3	15	2.0	3.0
5	覃晓娟	广西大学生命科学与技术学院	3	34	2.0	3.0