天冬酰胺合成酶B抑制剂高效液相色谱筛选方法的建立与应用

• 作者: 于丹 向文胜 张继 王相晶 范志金
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 高效液相色谱法 天冬酰胺合成酶B 抑制剂 筛选
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 472-475
• 页数: 4页
• 分类号: O658
• 字数: 2856字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8713.2009.04.018

摘要

建立了一种快速、高效测定天冬酰胺合成酶B(AS-B)酶活性的反相高效液相色谱法(RP-HPLC).酶反应体系中的氨基酸经 2,4-二硝基氟苯(DNFB)柱前衍生,通过RP-HPLC测定酶反应体系前后底物及产物的变化来分析酶的活性.采用的色谱柱为Agilent C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以50 mmol/L 醋酸钠缓冲液(pH 6.2)-乙腈(体积比为15∶85)为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为30 ℃,检测波长365 nm,于 6 min 内实现了各组分的基线分离.通过该方法测定反应动力学参数进行AS-B的抑制定量分析.将已知AS-B抑制剂L-谷氨酸-γ-甲酯作用于酶反应体系,测得的抑制剂的抑制常数与文献值相接近,证明该方法可用于AS-B抑制剂的筛选.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范志金	南开大学元素有机化学研究所	74	1244	19.0	32.0
2	向文胜	东北农业大学生命科学学院	75	943	16.0	28.0
3	王相晶	东北农业大学生命科学学院	57	480	13.0	18.0
4	张继	东北农业大学生命科学学院	4	9	2.0	2.0
5	于丹	东北农业大学生命科学学院	5	4	1.0	2.0