Apo-tPA融合蛋白在鸡胚肝细胞中的分泌表达及其活性检测

• 作者: 冯运巩 吴庭才 张旭 张春杰 李银聚 王学强 程相朝 郁川
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 组装前体apo-B100 人组织型纤溶酶原激活剂 融合基因 鸡胚肝细胞 活性检测
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 517-521
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

为了探讨apo-B100介导的t-PA融合蛋白在鸡胚肝细胞中分泌表达的可行性和生物学活性,将编码人组织型纤溶酶原激活剂功能区的基因片段△t-PA与鸡VLDLy组装前体apo-B100进行融合,定向克隆到pCDNAa表达载体CMV启动子下游,构建pCDNA_3-apo-△tPA表达载体.将pCDNA_3-apo-△tPA用脂质体包裹后转染体外培养的鸡胚肝细胞,ELISA检测融合蛋白表达水平,发色底物法检测表达产物的生物学活性.结果显示,融合基因在鸡胚肝细胞中能够表达并分泌到细胞外,48 h表达水平最高达575.3 ng/10~6(cells·24 h),表达产物活性为135.8 IU/10~6(cells·24 h).apo-B100介导的t-PA在鸡胚肝细胞中成功表达,为外源基因在鸡体内表达并实现在卵黄中沉积奠定了坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程相朝		144	685	15.0	20.0
2	张春杰		127	593	13.0	19.0
3	李银聚		109	487	11.0	16.0
4	吴庭才		107	550	13.0	19.0
5	张旭		6	8	2.0	2.0
6	郁川		14	69	3.0	8.0
7	冯运巩		2	2	1.0	1.0
8	王学强		3	4	2.0	2.0